高效液相色譜儀分析中進(jìn)樣上柱的樣品必須是可重現(xiàn)的均質(zhì)溶液,樣品前處理是為了盡可能除去對(duì)分析有干擾的雜質(zhì),保證重現(xiàn)性好,不損害色譜柱,能與HPLC色譜條件相兼容。
一、溶劑:
溶解樣品的溶劑應(yīng)能溶于流動(dòng)相而不影響樣品的保留值和分離度,最好使用流動(dòng)相溶解樣品或使用比初始比例流動(dòng)相洗脫能力更弱的溶劑溶解樣品。當(dāng)樣品所用溶劑與流動(dòng)相不一致時(shí),應(yīng)避免樣品進(jìn)入柱中時(shí)因溶解度降低而導(dǎo)致沉淀。
未溶解的或含顆粒物的樣品溶液會(huì)造成堵塞,進(jìn)樣前一定要使用合適的濾膜過(guò)濾。
二、進(jìn)樣量:
在分析型色譜中,加到色譜柱上的樣品量一般是μg級(jí),也可以更少。如果樣品溶液濃度過(guò)大,可通過(guò)稀釋降低溶液中被測(cè)物的濃度,以避免色譜柱超載或檢測(cè)器超限。進(jìn)樣體積應(yīng)盡量小,避免由于體積過(guò)載對(duì)分離造成不良影響。
為適應(yīng)檢測(cè)靈敏度的需要,某些痕量分析需要將樣品濃縮和富集。
三、樣品純度:
可根據(jù)樣品性質(zhì)和分離目的使用固相萃取和溶劑萃取等樣品前處理手段,最大程度的除去干擾物,達(dá)到純化和富集目標(biāo)化合物的目的,同時(shí)延長(zhǎng)色譜柱使用壽命。
組分非常復(fù)雜的樣品往往需要預(yù)分離為簡(jiǎn)單的片段,避免色譜峰過(guò)分重疊。
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