高效色譜儀的適用性試驗通常包括理論塔板數(shù)、分離度、精密度和對稱因子等指標(biāo)。
一、理論塔板數(shù):
在規(guī)定的色譜條件下,注入樣品溶液,記錄色譜圖,量出樣品峰的保留時間tr(以分鐘或長度計)和半峰寬(W0.5h),按n = 5.54(tr/W0.5h)2計算色譜柱的理論塔板數(shù)。若達(dá)不到規(guī)定的理論塔板數(shù),需更換色譜柱。
二、分離度:
分離度是相鄰兩組分色譜峰保留值之差與兩組分色譜峰底寬平均值的比值。即:
R = 2(tr2-tr1)/(W1+W2)
式中:tr為組分保留時間,W為峰底寬。
無論是定性分析還是定量分析,均要求待測峰與其它峰之間有較好的分離度。
除另有規(guī)定外,分離度應(yīng)大于1.5。
三、精密度:
精密度指使用同一方法、對同一樣品進(jìn)行多次測定所得測定結(jié)果的一致程度。通常以相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。
取各品種項下的對照溶液,連續(xù)進(jìn)樣5次,除另有規(guī)定外,其峰面積測量值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于2%。
四、對稱因子:
fs = W0.05h/(2A)=(A + B)/(2A)
式中:W0.05h為0.05倍峰高處的峰寬。
A、B分別為0.05倍峰高處的色譜峰前沿和后沿與峰頂點至基線的垂線之間的距離。
1、對稱峰:fs = 0.95~1.05
2、前延峰:fs<0.95
3、拖尾峰:fs>1.05
為保證分離效果和測量精度,應(yīng)檢查待測峰的對稱因子是否符合各品種項下的規(guī)定。
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