高效毛細(xì)管柱色譜儀固定液的涂漬方法有靜態(tài)法、動(dòng)態(tài)法和交聯(lián)鍵合法。

一、靜態(tài)法：

操作時(shí)，把固定液的稀溶液（0.2%～2%）用真空泵吸入毛細(xì)管柱中，一端封口，從另一端抽真空，在低于溶劑沸點(diǎn)10～15℃的恒溫條件下使溶劑慢慢蒸發(fā)，這樣在柱內(nèi)壁上留下一層薄薄的液膜。靜態(tài)法涂漬中，毛細(xì)管口的密封是關(guān)鍵問題，溶劑與封口的交界面不能有氣泡，否則將會(huì)把柱內(nèi)的部分或全部涂漬固定液帶出柱外。

為了縮短涂漬時(shí)間，選用溶劑時(shí)除了考慮對(duì)固定液的溶解性外，還應(yīng)盡量選用揮發(fā)性強(qiáng)的。如一支長(zhǎng)20m、內(nèi)徑0.3mm的毛細(xì)管柱在室溫下蒸發(fā)，若用二氯甲烷作溶劑需要15h，而選用戊烷只需要8h。

為了加快溶劑的揮發(fā)速度，建立了所謂自由逸出靜態(tài)法涂漬，即在高于溶劑沸點(diǎn)75℃或80℃的恒溫條件下進(jìn)行，不需抽真空，使溶劑自由揮發(fā)。蒸發(fā)溶劑時(shí)，在毛細(xì)管柱尾接上一根緩沖柱以增加阻力。

靜態(tài)法涂漬重現(xiàn)性好，柱效高，液膜厚度能準(zhǔn)確計(jì)算，適用于表面張力較大或粘稠的固定液，但不適用于粘度低的固定液。

二、動(dòng)態(tài)法：

動(dòng)態(tài)法涂漬固定液是用高壓惰性氣體推動(dòng)固定液溶液通過毛細(xì)管柱，在柱內(nèi)壁上留下一層液膜。

固定液的濃度一般10%～20%，根據(jù)固定液粘度和極性不同選擇二氯甲烷或丙酮作溶劑。操作時(shí)，在毛細(xì)管柱尾接上一根與柱內(nèi)徑相同、長(zhǎng)度約10m的緩沖柱，以免溶液走到柱尾時(shí)速度發(fā)生變化。將緩沖柱的另一端插入固定液溶液中，用高壓氮?dú)庠趪?yán)格控制流速條件下將固定液壓人毛細(xì)管柱內(nèi)。當(dāng)溶液到達(dá)柱體積的1/5～1/10時(shí)，將插入固定液溶液中的毛細(xì)管柱拉起離開液面，用氮?dú)馔苿?dòng)溶液的液柱向前移動(dòng)，速度為2～6cm/s，不得超過10cm/s。涂完后毛細(xì)管柱繼續(xù)通氮?dú)?～4h，以完全除去溶劑。

動(dòng)態(tài)法涂漬速度快，但常得不到均勻的液膜，重復(fù)性較差，柱效比靜態(tài)法低。

三、交聯(lián)鍵合法：

毛細(xì)管柱的交聯(lián)鍵合是指將涂漬在毛細(xì)管柱內(nèi)表面的固定液通過分子間的共價(jià)連接（交聯(lián)），或與毛細(xì)管柱內(nèi)表面連接（鍵合），使液膜穩(wěn)定性得到提高的制備技術(shù)。交聯(lián)鍵合可通過固定液的縮合或固定液柱壁上的硅醇基反應(yīng)形成Si－O－Si鍵，或聚硅氧烷上的甲基或乙烯基經(jīng)引發(fā)劑引發(fā)產(chǎn)生Si－C－C－Si（即碳與碳間形成鍵）反應(yīng)來實(shí)現(xiàn)。

1、加熱縮合法：

（1）原理：涂漬在毛細(xì)管柱內(nèi)表面的端羥基固定液在加熱過程中與玻璃表面的硅醇基產(chǎn)生縮合鍵合而實(shí)現(xiàn)交聯(lián)固化。

（2）方法：將含有一定數(shù)量交聯(lián)劑的端羥基固定液涂漬在毛細(xì)管柱上后，用N₂吹5min，然后把柱兩端封住，在恒溫箱中60℃保持1h，打開柱兩端并將柱子裝在色譜儀上，在約0.4bar壓力下通H₂沖洗，以1℃/min速度升至280℃保持6h，即可完成交聯(lián)固化。這種交聯(lián)固化可形成大分子網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，可提高柱子的熱穩(wěn)定性。例如非極性固定液通過甲基三乙基硅氧烷的縮合固化，可使柱子使用溫度提高到380～390℃。

（3）常用交換劑：甲基三甲基硅氧烷、二甲基二甲氧基硅氧烷和氰丙基三乙氧基硅氧烷。

（4）應(yīng)用：適用于端羥基固定液，能得到熱穩(wěn)定性和惰性都很好的毛細(xì)管柱。

2、原位自由基引發(fā)法：

（1）原理：主要是通過不同自由基母體，如過氧化合物、偶氮化合物、臭氧和γ幅射誘導(dǎo)等產(chǎn)生的自由基與聚合物鏈形成Si－C－C－Si鏈段交聯(lián)結(jié)構(gòu)。

（2）方法：將引發(fā)劑按一定比例與固定液混合配成涂漬液，按靜態(tài)法或動(dòng)態(tài)法涂漬毛細(xì)管柱，將柱兩端封住后放在色譜儀柱溫箱內(nèi)以41℃/min速度升至適當(dāng)溫度，保持一定時(shí)間進(jìn)行交聯(lián)固化。

對(duì)液體引發(fā)劑的交聯(lián)方法是先按常規(guī)方法涂漬毛細(xì)管柱，涂好后將N₂通入引發(fā)劑液體，把引發(fā)劑蒸氣帶入毛細(xì)管柱約2h，然后按與上述相同的條件交聯(lián)。對(duì)蒸氣壓較低的液體引發(fā)劑可直接加到固定液中。

（3）常用引發(fā)劑：

1）過氧化物引發(fā)劑：過氧化苯甲酰、過氧化二異丙苯、過氧化叔丁基和過氧化2，4－二氯苯甲酰。

過氧化苯甲酰和過氧化2，4－二氯苯甲酰都很活潑，可在較低的溫度下進(jìn)行交聯(lián)。缺點(diǎn)是會(huì)產(chǎn)生極性強(qiáng)的分解產(chǎn)物，改變固定液極性，在甲基聚硅氧烷固定液中溶解度小，容易引起交聯(lián)后的液膜不均勻。過氧化2，4－二氯苯甲酰的分解溫度比過氧化苯甲酰低，是值得推薦的引發(fā)劑。

過氧化二異丙苯和過氧化叔丁基分解溫度高，反應(yīng)活性小。但它們的分解產(chǎn)物為中性，對(duì)固定液和柱極性影響不大。

2）偶氮化合物引發(fā)劑：偶氮叔丁烷、偶氮叔辛烷、偶氮異丁氰和偶氮叔十二烷。

多種極性和非極性固定液都可由偶氮引發(fā)交聯(lián)，對(duì)固定液不會(huì)發(fā)生氧化，副產(chǎn)物對(duì)柱極性沒有影響。

效果最好的是偶氮叔丁烷和偶氮叔辛烷。

3）臭氧引發(fā)劑：

對(duì)OV－1、SE－33、SE－54和OV－215等固定液只需室溫即可交聯(lián)固化，對(duì)SE－30、OV－1701、SE－52和甲基氰丙基聚硅氧烷等固定液需在50～150℃交聯(lián)。

適用于中等極性和非極性固定液的引發(fā)交聯(lián)，也適用于含有甲苯基或乙烯基固定液的引發(fā)交聯(lián)。但由于臭氧要滲透到固定液中才能引發(fā)交聯(lián)，適用于薄膜毛細(xì)管柱的交聯(lián)。為減少柱子浪費(fèi)，柱子可先經(jīng)過評(píng)價(jià)，選質(zhì)量好的再通臭氧交聯(lián)。這種方法重復(fù)性好，設(shè)備簡(jiǎn)單，無殘留副產(chǎn)物。

（4）應(yīng)用：是廣為應(yīng)用的一類交聯(lián)方法。

3、交聯(lián)鍵合法特點(diǎn)：

（1）增大粘度，減小柱流失，提高毛細(xì)管柱使用溫度，使原來線性的固定液分子變成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。制備好后，用溶劑把未交聯(lián)的低分子物質(zhì)洗去，提高了固定液的熱穩(wěn)定性。

（2）抗溶劑沖洗，有利于毛細(xì)管柱內(nèi)污染物的清除。

（3）防止固定液在毛細(xì)管柱中脫落，允許注入大體積稀溶液，不會(huì)造成柱超載。

（4）固定液交聯(lián)形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)阻止固定液熱重排。

   

來源：http://www.fudizao.com