色譜柱是高效反相色譜儀最主要的部件，被測(cè)樣品能否被很好的分離和測(cè)定，色譜柱的性能起著決定性作用。因此，應(yīng)注意色譜柱的維護(hù)與清洗，以延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。

一、色譜柱清洗體積確定：

色譜柱清洗體積一般是柱體積的10～20倍。

根據(jù)柱內(nèi)徑和柱長(zhǎng)計(jì)算出柱體積，清洗時(shí)間可計(jì)算出。

二、色譜柱清洗：

為了使被測(cè)樣品和雜質(zhì)不停留在色譜柱內(nèi)，每次樣品分析完成后，應(yīng)及時(shí)清洗色譜柱。

反相色譜分析中先流出的物質(zhì)是極性大的物質(zhì)，每次樣品分析完成后，應(yīng)用100%的甲醇、異丙純或四氫呋喃等極性稍弱的溶劑將吸附在柱內(nèi)的極性小的物質(zhì)洗脫下來(lái)。如果流動(dòng)相是緩沖溶液，應(yīng)先用蒸餾水沖洗色譜柱，以沖掉柱內(nèi)的鹽，然后用合適的溶劑沖洗。

三、特殊清洗：

強(qiáng)保留物質(zhì)和大分子化合物在色譜柱中累積，對(duì)樣品中的化合物會(huì)產(chǎn)生額外的保留行為，會(huì)引起峰形變寬和拖尾，使柱效下降，引起保留時(shí)間的變化，累積到一定程度時(shí)還會(huì)導(dǎo)致柱壓升高。在每天的日常維護(hù)中應(yīng)用純甲醇或乙腈清洗色譜柱。

清洗方法：

1、未使用緩沖鹽：每天分析完成后，用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱60min。

2、使用過(guò)緩沖鹽：每天分析完成后，先除去緩沖鹽，再用純甲醇或乙腈反向沖洗色譜柱 60min。

四、色譜柱維護(hù)：

1、篩板阻塞解決方法：

（1）過(guò)濾流動(dòng)相。

（2）過(guò)濾樣品。

（3）使用預(yù)柱。

（4）使用保護(hù)柱。

2、柱頭塌陷解決方法：

（1）避免使用pH＞8的流動(dòng)相（針對(duì)大部分硅膠柱）。

（2）使用預(yù)柱。

（3）使用保護(hù)柱。

   

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