蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)是基于溶質(zhì)的光散射性質(zhì)進(jìn)行檢測(cè),是20世紀(jì)80年代出現(xiàn)的高效液相色譜儀檢測(cè)器。
一、結(jié)構(gòu):
ELSD由霧化器、加熱漂移管(溶劑蒸發(fā)室)、激光光源和光檢測(cè)器(光電轉(zhuǎn)換器)等組成。
二、工作原理:
高效液相色譜柱流出液導(dǎo)入霧化器后,被載氣(壓縮空氣或N2)霧化成微細(xì)液滴,液滴通過加熱漂移管時(shí),流動(dòng)相中的溶劑被蒸發(fā)掉,只留下溶質(zhì),激光束照在溶質(zhì)顆粒上產(chǎn)生光散射,光收集器收集散射光并通過光電倍增管轉(zhuǎn)變成電信號(hào),散射光強(qiáng)度的對(duì)數(shù)值與組分濃度的對(duì)數(shù)值呈線性關(guān)系。
三、特點(diǎn):
1、優(yōu)點(diǎn):
(1)最大優(yōu)點(diǎn)是能檢測(cè)不含發(fā)色團(tuán)的化合物。
(2)屬于通用性質(zhì)量型檢測(cè)器。因?yàn)镋LSD是檢測(cè)光散射變化,散射光強(qiáng)只與溶質(zhì)顆粒大小和數(shù)量有關(guān),與溶質(zhì)本身的物理和化學(xué)性質(zhì)無關(guān),對(duì)各種物質(zhì)的響應(yīng)幾乎相同。
(3)可檢測(cè)揮發(fā)性低于流動(dòng)相的任何樣品。
(4)流動(dòng)相低溫霧化和蒸發(fā),對(duì)熱不穩(wěn)定和揮發(fā)性化合物也有較高的靈敏度。
(5)廣泛的梯度和溶劑兼容性,無溶劑峰干擾。
(6)輔助載氣提高了檢測(cè)靈敏度,保持檢測(cè)池內(nèi)清潔,避免污染。
(7)高精度霧化和蒸發(fā)溫度控制,保證高精度檢測(cè)。
(8)可與任何高效液相色譜連接。
2、缺點(diǎn):
(1)靈敏度相對(duì)較低。
(2)不能使用不揮發(fā)性的流動(dòng)相,如磷酸鹽。
(3)要用霧化氣源,典型的是N2。
(4)不同色譜條件下的霧化和除溶劑參數(shù)需要重新優(yōu)化。
(5)蒸發(fā)出的溶劑要引到戶外或通風(fēng)櫥中。
(6)對(duì)揮發(fā)性化合物的檢測(cè)不理想。
(7)一般得到的是非線性校正曲線。溶質(zhì)濃度與峰面積不呈線性關(guān)系,分別取自然對(duì)數(shù)后呈線性關(guān)系。
(8)某些化合物的檢測(cè)靈敏度不如其它檢測(cè)器。
四、相關(guān)事宜:
1、洗脫液需要霧化,霧化氣流的純度和壓力影響檢測(cè)器的信噪比。
2、流動(dòng)相要蒸發(fā)掉,不能使用不易揮發(fā)的物質(zhì)調(diào)節(jié)流動(dòng)相pH值,可通過調(diào)節(jié)蒸發(fā)溫度使比被測(cè)物質(zhì)沸點(diǎn)低的組分蒸發(fā)。在不使被測(cè)物質(zhì)蒸發(fā)的前提下,溫度越高,流動(dòng)相蒸發(fā)越完全,基線越好,信噪比越高。如果被測(cè)物質(zhì)沸點(diǎn)接近或低于流動(dòng)相的蒸發(fā)溫度,則無法檢測(cè)(以100%的水作流動(dòng)相,沸點(diǎn)比水低的有機(jī)物質(zhì)完全可以用氣相色譜進(jìn)行分離檢測(cè))。由于流動(dòng)相和溶劑蒸發(fā)了,使用ELSD得到的色譜圖一般沒有溶劑峰,梯度洗脫沒有折光視差效應(yīng),一般不會(huì)出現(xiàn)基線漂移。
五、應(yīng)用:
適用于無紫外吸收、無電活性、不發(fā)熒光和揮發(fā)性低于流動(dòng)相的樣品的檢測(cè),主要用于糖類、高級(jí)脂肪酸、磷脂、維生素、氨基酸、甘油三酯、皂苷和甾體等無紫外吸收或紫外末端吸收的化合物的檢測(cè)。
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