高效液固吸附色譜儀常用固定相有硅膠、氧化鋁、活性炭和聚酰胺等。
一、硅膠:
硅膠通式為SiO2•XH2O,具有多孔性硅氧烷交聯(lián)結(jié)構(gòu)。由于其骨架表面具有很多游離和鍵合活性狀態(tài)硅醇基團(tuán),能通過氫鍵與極性或不飽和分子相互作用。硅膠的吸附能力與硅羥基數(shù)量有關(guān)。硅膠隨著含水量的增加,其活性降低,若硅膠游離水達(dá)到17%時(shí),其吸附能力極低。
色譜用硅膠應(yīng)該是中性無色顆粒,但是由于制造過程常接觸強(qiáng)酸,故在實(shí)驗(yàn)前一般要檢查酸性,不低于pH = 5才可使用,而且使用前一般在120℃烘24h活化。
硅膠柱色譜適用范圍廣,適用于非極性和極性混合物的分離。
二、氧化鋁:
氧化鋁是由Al(OH)3直接在約600℃高溫下脫水制得,主要為γ~Al2O3,有中性、酸性和堿性三種。
中性氧化鋁適用于醛酮、萜類及對(duì)酸堿不穩(wěn)定的酯和內(nèi)酯有機(jī)物的分離。
酸性氧化鋁適用于有機(jī)酸、酸性氨基酸和酚類物質(zhì)的分離。
堿性氧化鋁分離植物中堿性成分(如生物堿)頗為理想,也適用于萜類、甾體和強(qiáng)心苷等分離。
氧化鋁的活性與含水量關(guān)系極大,在一定溫度下除去水分,可使氧化鋁活化,加入一定量水即可使活性改變。氧化鋁的活化比硅膠所需的溫度要高的多,因而需要在高溫爐中進(jìn)行,常規(guī)的烘箱不能完成對(duì)氧化鋁的活化。
硅膠和氧化鋁均為極性吸附劑,有以下特性:
對(duì)極性物質(zhì)具有較強(qiáng)的親和能力。同為溶質(zhì),極性強(qiáng)者優(yōu)先被吸附。
溶劑極性越弱,吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附能力越強(qiáng)。溶劑極性增強(qiáng),吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附能力隨之減弱。
溶質(zhì)即使被硅膠和氧化鋁吸附,一旦加入極性較強(qiáng)的溶劑,就被后者置換洗脫下來。
三、活性炭:
活性炭的吸附作用與硅膠和氧化鋁相反,對(duì)非極性物質(zhì)具有較強(qiáng)的親和力,水溶液中吸附最強(qiáng),有機(jī)溶劑中較弱。在一定條件下,對(duì)芳香化合物的吸附力大于脂肪族化合物,對(duì)大分子量化合物的吸附力大于小分子量化合物。利用這些吸附性能差別,可將水溶性芳香族物質(zhì)與脂肪族物質(zhì)分開,單糖與多糖分開,氨基酸與多肽分開。
四、聚酰胺:
聚酰胺是通過酰氨基聚合而成的一類高分子化合物,可與酚類、酸類、醌類和硝基化合物等形成氫鍵結(jié)合而被吸附,而使這些有機(jī)物與不能形成氫鍵的化合物分離。
主要用于酚類黃酮體和蒽醌等有機(jī)物的分離。
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