高效液相色譜儀分析的定量方法有歸一化法、外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法等。
一、歸一化法:
歸一化法要求所有組分都能分離并有響應(yīng),由于高效液相色譜常用的檢測器為選擇性檢測器,對(duì)很多組分沒有響應(yīng),因此,高效液相色譜定性較少使用歸一化法。
二、外標(biāo)法:
外標(biāo)法就是常用的標(biāo)準(zhǔn)曲線法。
具體做法:將被測組分的純物質(zhì)配制成濃度與被測組分十分相近的溶液,然后取一定量的標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液進(jìn)行色譜分析,得到標(biāo)準(zhǔn)樣品的標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)是通過原點(diǎn)的直線。若不通過原點(diǎn),說明存在系統(tǒng)誤差。分析樣品時(shí),在上述完全相同的色譜條件下,取制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)同樣量的被測樣品進(jìn)行色譜分析,根據(jù)所得的峰面積或峰高,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出被測組分的含量。
三、內(nèi)標(biāo)法:
內(nèi)標(biāo)法是比較精確的一種定量方法。
準(zhǔn)確稱取樣品,加入一定量某種純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物,然后進(jìn)行色譜分析。根據(jù)樣品和內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量以及被測組分和內(nèi)標(biāo)物的峰面積的比值,求出被測組分的含量。
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