在反相鍵合相色譜儀中， C₁₈是常用的鍵合固定相，水是常用的流動(dòng)相弱組分，重要的是選擇流動(dòng)相的強(qiáng)組分，常用的強(qiáng)組分有甲醇、乙腈和四氫呋喃。反相鍵合相色譜儀流動(dòng)相的選擇規(guī)則如下：

一、若樣品中含有兩個(gè)以下氫鍵作用基團(tuán)（如－COOH、－NH₂和－OH等）的芳香烴鄰、對(duì)位或鄰、間位異構(gòu)體，可選用甲醇－水為流動(dòng)相。

二、若樣品中含有兩個(gè)以上Cl、I、Br鄰、間、對(duì)位異構(gòu)體或極性取代基的間、對(duì)位異構(gòu)體以及雙鍵位置不同的異構(gòu)體，可選用乙腈－水為流動(dòng)相。

三、當(dāng)樣品的 k′＞30（一般要求1＜k′＜20）時(shí)，應(yīng)在甲醇－水流動(dòng)相中加入適量四氫呋喃、氯仿或丙酮，使樣品的k′值保持在適當(dāng)范圍內(nèi)，也可以通過(guò)減少固定相表面鍵合碳鏈濃度或縮短碳鏈長(zhǎng)度來(lái)減小k′值。

四、若樣品中含有－NH₂這類基團(tuán)時(shí)，應(yīng)在流動(dòng)相中加入適量有機(jī)胺添加劑，以提高樣品保留值的重現(xiàn)性和色譜峰的對(duì)稱性。

   

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