色譜儀分析的分離度R是相鄰兩組分色譜峰保留值之差與兩組分色譜峰底寬度平均值的比值。分離度R是既能反映柱效率又能反映選擇性的指標，又稱總分離效能指標。

R = 2（t_R2－t_R1）/（W₁+W₂）

式中：t_R為組分的保留時間，W為組分的色譜峰寬。

分離度R的定義并未反映影響分離度的各種因素，R未與影響其大小的因素（柱效n、選擇因子α和分配比k）聯(lián)系起來。對于相鄰的兩難分離組分，由于它們的分配系數(shù)K相差小，可合理假設(shè)k₁≈k₂ = k，W₁≈W₂ = W，可推導(dǎo)出R與n、α和k的關(guān)系：

R =（n^2/1/4）×[（α－1）/α]×[k/（k + 1）]

上式即為色譜儀基本分離方程。

一、分離度R與柱效n的關(guān)系：

R₁²/R₂² = n₁/n₂= L₁/L₂

R與n有關(guān)，即R受熱力學因素的影響。

對具一定相對保留值α的物質(zhì)對，R與有效塔板數(shù)n有效有關(guān)，說明n有效可正確代表柱效能。

增加柱長，理論塔板數(shù)會增加，可提高分離度。但分析時間會延長，峰展寬。為提高柱效，采用減小塔板高度H的方法比增加柱長更有效。

二、分離度R與選擇因子α的關(guān)系：

α越大，柱選擇性越好，對分離有利。α的微小變化可引起R較大改變。

改變α的方法：

1、在GC中，改變柱溫、固定相的性質(zhì)及組成。改變固定相的性質(zhì)及組成是改變α最有效的手段。

2、在LC中，改變固定相和流動相的性質(zhì)及組成。改變流定相的性質(zhì)及組成是改變α最有效的手段。

三、分離度R分配比k的關(guān)系：

k增加，R增加。但當k＞10時，R的增加不明顯。通常k = 1～10，k最佳范圍為2～5。k太小，不利于分離。k太大，可能使樣品在流動相中沉淀。

改變k的方法：

1、在GC中，改變柱溫、固定相的性質(zhì)及組成、相比。

2、在LC中，改變固定相和流動相的性質(zhì)及組成、相比。

四、分離度R與保留時間t_R的關(guān)系：

R₁²/R₂² = t_R1/t_R2

   

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