高效毛細管電泳儀是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅(qū)動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數(shù)差異進行分離,影響電泳遷移率的因素有內(nèi)在因素和外界因素。
一、影響電泳遷移率的內(nèi)在因素:
1、溶質(zhì)所帶凈電荷的量:
溶質(zhì)所帶凈電荷的量越大,遷移率越大。
2、溶質(zhì)大小和形狀:
對于球形離子:μep = vep/E = q/(6πηr)
對于棒狀離子:μep = vep/E = q/(4πηr)
二、影響電泳遷移率的外界因素:
1、電場強度:
電滲速度和電場強度成正比。
2、毛細管材質(zhì):
酸度影響毛細管表面Si-OH基的電離。特別是在pH = 4~7范圍內(nèi),影響更顯著,此時溶液pH值與電滲速度成近線性關(guān)系。
3、載體粘性:
阻礙泳動并有吸附作用。
4、溶液pH值:
溶液pH值決定帶電顆粒的解離程度,也決定顆粒所帶凈電荷的多少。
5、緩沖液離子強度:
緩沖液中的離子增加會使遷移率降低,原因是帶電離子會吸引相反符號的離子聚集在其周圍,形成一個與該離子符號相反的離子氛,使該離子向相反的方向運動,從而降低該離子的遷移率。
緩沖液離子強度,影響雙電層的厚度、溶液粘度和工作電流,明顯影響電滲速度大小。
6、添加劑:
(1)加入濃度較大的中性鹽如K2SO4,溶液離子強度增大,電滲速度減小。
(2)加入表面活性劑,可改變電滲速度的大小和方向。
(3)加入有機溶劑如甲醇和乙腈,使溶液粘度減小,電滲速度增大。
7、溫度:
毛細管內(nèi)溫度升高,使溶液粘度下降,電滲速度增大。
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