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高效毛細(xì)管凝膠電泳儀簡介 
(發(fā)布日期:2016-3-8 10:31:44) 來源:
 
   
高效毛細(xì)管凝膠電泳儀(CGE)是20世紀(jì)80年代后期發(fā)展起來的毛細(xì)管電泳分離模式。它是將凝膠電泳儀對生物大分子的高效分離能力與毛細(xì)管電泳儀的快速、微量和定量分析相結(jié)合,是當(dāng)今分離度極高的一種分離技術(shù)。
一、工作原理:
將聚丙烯酰胺等在毛細(xì)管中交聯(lián)生成凝膠,以凝膠作為載體進(jìn)行電泳,凝膠具有多孔性,類似分子篩的作用,樣品分子按大小分離。
二、凝膠類型:
1、無機(jī)凝膠:
(1)多孔硅膠。
(2)多孔玻璃。
2、有機(jī)凝膠:
(1)聚丙烯酰胺。
(2)瓊脂糖。
三、凝膠柱制備:
CGE的關(guān)鍵是凝膠柱的制備,常用聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行DNA片段分析和測序。測定蛋白質(zhì)和肽的分子量常用十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺電泳(SDS-PAGE)。
將單體丙烯酰胺溶液中的交聯(lián)劑N,N′-甲叉雙丙烯酰胺(Bis)的濃度降為零,得到低粘度的線性非交聯(lián)的親水性聚合物用作操作溶液,來代替高粘度交聯(lián)聚丙烯酰胺,仍有按分子大小分離的作用。無膠篩分柱易制備,使用方便,但分離能力比凝膠柱差。
四、特點:
1、抗對流性好,散熱性好,分離度極高。
2、能有效減小組分?jǐn)U散,峰形尖銳。
五、應(yīng)用:
蛋白質(zhì)和DNA等的荷質(zhì)比與分子大小無關(guān),CZE分離模式很難分離,采用CGE能獲得良好分離。
   
來源:http://www.fudizao.com
   
 
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