影響高效毛細(xì)管電泳儀分離效果的因素有電場強(qiáng)度、緩沖液pH、離子強(qiáng)度、溫度和添加劑等。
一、電場強(qiáng)度:
1、結(jié)果:
電滲速度與電場強(qiáng)度成正比。
2、說明:
(1)電場強(qiáng)度降低,分離效率和分辨率降低。
(2)電場強(qiáng)度增大,焦耳熱增大。
二、緩沖液pH:
1、結(jié)果:
pH增大,電滲速度增大。
2、說明:
(1)改變電滲速度最方便有用的方法。
(2)可能會(huì)引起組分電荷和結(jié)構(gòu)改變。
三、離子強(qiáng)度(緩沖液濃度):
1、結(jié)果:
離子強(qiáng)度增大,Zeta電位降低,電滲速度降低。
2、說明:
(1)離子強(qiáng)度增大,電流和焦耳熱增大。
(2)離子強(qiáng)度低,可能存在樣品吸附問題。
(3)導(dǎo)電性與樣品不同,可能引起峰形畸變。
(4)離子強(qiáng)度低,樣品裝載量小。
四、溫度:
1、結(jié)果:
溫度每改變1℃,溶液粘度變化約2%~3%。
2、說明:
溫度由儀器自動(dòng)控制,常用方法。
五、添加劑:
1、結(jié)果:
(1)加入濃度較大的中性鹽如K2SO4,離子強(qiáng)度增大,電滲速度降低。
(2)加入表面活性劑,可改變電滲速度的大小和方向。某些陽離子表面活性劑使電滲速度降低,某些陰離子表面活性劑如十二烷基硫酸鈉(SDS),可使壁表面負(fù)電荷增加,電滲速度增大。
(3)加入有機(jī)溶劑如甲醇和乙腈,使溶液粘度減小,電滲速度增大。
2、說明:
變化復(fù)雜,其影響應(yīng)通過實(shí)驗(yàn)測定,可能改變選擇性。
來源:http://www.fudizao.com