色譜儀分離度方程為R =（n^2/1/4）×[（α－1）/α]×[k/（k + 1）]

式中：n^2/1/4為柱效項，（α－1）/α為柱選擇項，k/（k + 1）為柱容量項。

改善色譜儀分離度的一般原則是增加△t_R和減小譜帶寬度W。

一、增加△t_R：

即增加相鄰組分保留時間的差值：

1、增加柱長：

對于長度不同的同一種色譜柱：

R₂/R₁ =（n₂/n₁）^1/2 =（L₂/L₁）^1/2

式中：L₁、L₂分別為兩根色譜柱的長度。

可見，增加色譜柱長度，理論塔板數(shù)會增加，可提高分離度。

2、增加固定相的量：

增加固定相的量，k增加，柱容量項增加，分離度增加。

3、選擇分離因子較大的色譜條件：

（1）降低柱溫：

氣相色譜中常用。

在氣相色譜中，㏑α= 2.13/（RT_c）×（T_b2－T_b1）+ c

式中：T_c為柱溫，T_b1和 T_b2 分別為組分1、2的沸點，c為常數(shù)，R為熱力學常數(shù)。

可見，降低柱溫，分離因子增加，柱選擇項增加，分離度增加。

（2）選擇不同的固定相：

填充柱氣相色譜中常用。

（3）選擇不同的流動相：

高效液相色譜中常用。

二、減小譜帶寬度W：

1、提高柱效，減小塔板高度：

使用填料顆粒更細、更均勻的填充色譜柱。

2、減小色譜儀的死體積：

如在填充經(jīng)典的制備柱時，經(jīng)常采用濕法裝柱。柱子裝好后一般要在流動相流動的情況下給出足夠的時間讓固定相沉降，等固定相不再沉降后才能上樣品。

3、進樣量：

防止色譜柱超載。

   

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