液液分配色譜儀原本是基于樣品分子在包覆于惰性載體（基質(zhì)）上的固定相液體和流動(dòng)相液體之間的分配平衡而實(shí)現(xiàn)分離，因?yàn)楣潭ㄏ嘁后w容易溶解到流動(dòng)相中去，所以重現(xiàn)性很差，不大被人們采用。后來發(fā)展起來的鍵合固定相通過化學(xué)鍵合將功能分子結(jié)合到惰性載體上，固定相液體不會(huì)溶解到流動(dòng)相中。鍵合固定相是當(dāng)今高效液相色譜儀最常用的固定相，大約占高效液相色譜儀固定相的四分之三。

一、極性鍵合固定相：

鍵合在載體表面的功能分子是具有二醇基、醚基、氰基和氨基等極性基團(tuán)的有機(jī)分子。

二、非極性鍵合固定相：

鍵合在載體表面的功能分子是烷基和苯基等非極性有機(jī)分子。最常用的ODS柱或C18柱，它是將十八烷基三氯硅烷通過化學(xué)反應(yīng)與硅膠表面的硅羥基結(jié)合，在硅膠表面形成化學(xué)鍵合態(tài)的十八烷基，其極性很小。

三、正相液液分配色譜：

由極性固定相和非極性（或弱極性）流動(dòng)相組成的高效液相色譜體系。其代表性的固定相是改性硅膠和氰基柱等，代表性的流動(dòng)相是正己烷。

四、反相液液分配色譜：

由非極性固定相和極性流動(dòng)相組成的高效液相色譜體系。其代表性的固定相是十八烷基鍵合硅膠，代表性的流動(dòng)相是甲醇和乙腈。反相液液分配色譜是當(dāng)今高效液相色譜的最主要分離模式，幾乎適用于所有能溶于極性或弱極性溶劑中的有機(jī)物的分離。

   

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