動(dòng)物肝臟細(xì)胞勻漿后，其成分大致可分為：一是完整的的細(xì)胞器，包括細(xì)胞核、線粒體、溶酶體、微粒體和分泌顆粒。二是膜相系統(tǒng)，包括細(xì)胞膜、內(nèi)質(zhì)膜和高爾基體等。在等滲介質(zhì)中用勻漿器對(duì)動(dòng)物肝臟細(xì)胞進(jìn)行勻漿，通過(guò)立式高速冷凍離心機(jī)差速離心，各步沉淀中包含著不同的勻漿成分。分離過(guò)程如下：

第一次離心：用50mL尖底塑料離心管，在立式高速冷凍離心機(jī)中1000g離心10min。

第二次離心：第一次離心后得到的上清液，用50mL聚碳酸酯離心管，3000g離心10min。

第三次離心：第二次離心后得到的上清液，用50mL聚碳酸酯離心管，6000g離心10min。

第四次離心：第三次離心后得到的上清液，用50mL聚碳酸酯離心管，10000g離心10min。

第五次離心：第四次離心后得到的上清液，用50mL聚碳酸酯離心管，20000g離心10min。

第六次離心：第五次離心后得到的上清液，用50mL聚碳酸酯離心管，100000g離心10min。

離心過(guò)程中，樣品體積大，沉降路徑長(zhǎng)，要相應(yīng)增加離心轉(zhuǎn)速或延長(zhǎng)離心時(shí)間。樣品體積小，靠近離心管底部受到的離心力大，要相應(yīng)降低離心轉(zhuǎn)速或縮短離心時(shí)間。可用K值近似確定離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間。

 

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